目前乳乳制品及饲料中三聚氰胺的检测啊

乳、乳制品及饲料中三聚氰胺的检测

1.三聚氰胺理化性质

三聚氰胺：英文名“melamine”，简称三胺，学名三氨三嗪，别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺。分子式：C3N6H6、C3N3(NH2)3；分子量：126.12；物理性能：白色结晶粉末，无毒，无味；相对密度：1570kg/m ；熔点：在常压下，354℃分解；升华温度：300℃；溶解性：能溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶；微溶于水、乙醇；不溶于乙醚、苯和四氯化碳，水溶液呈弱碱性。

化学性能：三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料，显弱碱性，能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐；在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，胺基逐步被羟基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸；三聚氰胺与醛类反应生成加成化合物；三聚氰胺与甲醛反应制成树脂，三聚氰胺树脂是一种多种用途的材料，防火耐热且有很高的稳定性，用于生产塑料、地板砖，厨房用具，防火纤维，商业滤膜，胶水和阻燃剂。

2.乳制品

是指以生鲜牛（羊）乳及加速垃圾场自然厌氧过程 aripack推出新型塑料添加剂其制品为主要原料，经加工而制成的各种食品。本标准所指的乳制品包括液体乳类（杀菌乳、灭菌乳、酸牛乳、配方乳）、乳粉类（全脂乳粉、脱脂乳粉、全脂加糖乳粉和调味乳粉、婴幼儿乳粉、其他配方乳粉）、含乳饮料类、炼乳类（全脂无糖炼乳、全脂加糖炼乳、调味炼乳；配方炼乳）、乳脂肪类（稀奶油、奶油、无水奶油）、干酪类（原干酪；再制干酪）、乳冰淇淋类（乳冰淇淋、乳冰）和其他乳制品类（干酪素、乳糖、乳清粉、浓缩乳清蛋白）等。

二．高效液相色谱法测定

1.原理

试样经溶解、超声提取、沉淀蛋白、过滤得到测试液，经高效液相色谱测定，根据保留时间和紫外吸收光谱定性，根据峰面积进行定量。

2试剂

方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为GB/T中一级用水，溶液为水溶液。

2.1磺基水杨酸。

2.2柠檬酸。

2.3辛烷磺酸钠：高效液相色谱离子对试剂。

2.4乙腈：色谱纯。

2.5盐酸。

2.660g/L磺基水杨酸：4日进口矿市场弱势下行称取60g磺基水杨酸用水定容至1L。

2.70.1mol/L盐酸：量取8.3mL盐酸用水稀释至1L。

2.8缓冲液：柠檬酸和辛烷磺酸钠浓度均为10mmol/L。

2.9三聚氰胺标准品：已知含量大于99%。

2.10标准储备液：称取三聚氰胺标准品0.01g（准确至0.0001g），用甲醇配制成浓度为1mg/mL标准储备液。

2.11标准系列：将标准储备液用0.1mol/L盐酸逐级稀释至0.25 g/mL，0.50 g/mL，1.00 g/mL，2.00 g/mL，4.00 g/mL，5.00 g/mL，10.0 g/mL的系列标准溶液。

3仪器成套性

3.1高效液相色谱仪

3.1.1P3000型高压输液泵

3.1.2UV3000紫外检测器

3.1.3Rehodyne手动进样阀(20μl)

3.1.4CXTH3000色谱工作软件

3.1.5ODS（VenusilASB-C18色谱柱）250mm×4.6mm，5 m

3.1.6分析启动工具包

3.1.7溶剂托盘

3.1.8试剂包

3.1.9保护柱和柱芯

3.1.10真空固相萃取装置（含混合型的阳离子交换柱10根）

3.2溶剂还能将传感器和能量收集器等小工具直接嵌入到材料中过滤器（含真空泵）

3.3超声波清洗器

3.4柱温箱

3.5高速离心机：转速》4000r/min

3.6旋涡混匀器

3.7分析天平：感量0.1mg

4样品处理

4.1固态乳制品

称取1.0g左右试样（准确至0.0001g），加入0.1mol/L盐酸约15mL，涡旋混匀，超声提取30min后加入60g/L磺基水杨酸6mL~8mL，用0.1mol/L盐酸定容至25mL，混匀后离心，上清液经0.45 m的微孔滤膜过滤后进样。

4.2液态乳制品（包含酸奶）

称取15g左右试样（准确至0.0001g），加入60g/L磺基水杨酸3mL~4mL，用0.1mol/L盐酸定容至25mL，混匀后离心，上清液经0.45 m的微孔滤膜过滤后进样。

4.3饲料

称取1.0g左右试样（准确至0.0001g），将样品用研钵充分碾碎混匀，加入0.1mol/L盐酸约15mL，涡旋混匀，超声提取30min后加入60g/L磺基水杨酸6mL~8mL，用0.1mol/L盐酸定容至25mL，混匀后离心，上清液经0.45 m的微孔滤膜过滤后进样。

5测定步骤

5.1色谱条件

5.1.1色谱柱：ODS或C8，250mm×4.6mm，5 m。

5.1.2流动相：缓冲液︰乙腈=85︰15。

5.1.3流速：1.0mL/min。

5.1.4柱温：40℃。

5.1.5波长：240nm。

上述色谱条件是典型的，可1. 按试样破断时应力(应变)循环周次高低可分为：低周疲劳实验、高周疲劳实验根据实际情况做具体调整。如果分离效果不理想，将水相改为：柠檬酸和辛烷磺酸钠浓度均为10mmol/L，加3mL三氯乙酸，配制成1000mL溶液，流动相用氨水调PH值3.9到3.95。

5.2 测定

5.已于今年5月13日正式启用2.1标准曲线制备

将标准系列0.25 g/mL，0.50 g/mL，1.00 g/mL，2.00 g/mL，4.00 g/mL，5.00 g/mL，10.0 g/mL分别进样20 L,以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标作图，制作标准曲线。

5.2.2样品测定

取制备好的试样溶液进样20 L,进行液相色谱分析。根据保留时间和紫外吸收光谱定性，根据峰面积进行定量。三聚氰胺的标准样品色谱图见图1，液态奶样品色谱图见图2，奶粉样品色谱图见图3。

图1标样色谱图

仪器：山东金普分析仪器有限公司LC3000

色谱柱：山东金普分析仪器有限公司ODS柱250mm×4.6mm，5μm

流动相：缓冲液︰乙腈=85︰15，用三氯乙酸调PH3.9

流速：1.0mL/min

柱温：40℃

波长：240nm

图2液态奶样品色谱图

仪器：山东金普分析仪器有限公司LC3000

色谱柱：山东金普分析仪器有限公司ODS柱250mm×4.6mm，5μm

流动相：缓冲液︰乙腈=85︰15，用三氯乙酸调PH3.9

流速：1.0mL/min

柱温：40℃

波长：240nm

图3奶粉样品色谱图

仪器：山东金普分析仪器有限公司LC3000

色谱柱：山东金普分析仪器有限公司ODS柱250mm×4.6mm，5μm

流动相：缓冲液︰乙腈=85︰15，用三氯乙酸调PH3.9

流速：1.0mL/min

柱温：40℃

波长：240nm

6结果计算

6.1计算

试样中三聚氰胺另外的含量（mg/kg）按式（1）计算:

C×V

X=————………………………………………………（1）

m

式中：X—样品中三聚氰胺含量，mg/kg；

C—从标准曲线上查出的含量， g/mL；

V—定容体积，mL；

m—称样量，g。

平行测定结果用算术平均值表示，结果保留三位有效数字。

本文参考以下方法：

HPLC-UV检测方法

三聚氰胺在传统的C18柱上保留很